L'albumine sérique humaine de recombinaison A est structurellement et biochimiquement équivalente au pHSA

L'albumine sérique humaine de recombinaison A est structurellement et biochimiquement équivalente au pHSA

Description

L'albumine sérique humaine de recombinaison biotechnologique de Healthgen est origine animale librement, qui évitent effectivement n'importe quel risque potentiel de contaminants animaux, de bactéries, de prions, de virus et de maladie contagieuse de protéine. La plate-forme spécifique d'expression d'endosperme de riz est facile à être à grande échelle. L'endosperme de riz a le corps de protéine, qui peut garde la stabilité et la bioactivité de protéines. Actuellement, la capacité de production est presque 1000 kilogrammes/année.

OsrHSA est structurellement et biochimiquement équivalent au pHSA.

L'OsrHSA exprimé a la mêmes masse moléculaire, séquence des acides aminés, terminus de n et de C, et point de fusion comme pHSA. Le spectre circulaire de dichroïsme (CD) d'OsrHSA dans la région proche et loin-UV s'est assorti que du pHSA, indiquant que la structure secondaire et tertiaire d'OsrHSA sont identique à ceux du pHSA. L'analyse spectroscopique a plus loin confirmé qu'OsrHSA a la même conformation que le pHSA.

Pour caractériser la structure d'OsrHSA, un complexe acide OsrHSA-myristique a été cristallisé, et la structure a été résolue par le remplacement moléculaire utilisant précédemment le déterminé A la structure à une amélioration de 2,5 Å (code d'identification d'APB 1BJ5), présentant une valeur sans r finale de 0,303. Un cristal de deux molécules indépendantes d'OsrHSA a été obtenu en unité asymétrique. La structure globale d'OsrHSA est une forme de coeur constituée par trois domaines hélicoïdaux, a indiqué I, II, et III, et avec des acides myristiques liés aux cavités hydrophobes. Une superposition de tous les atomes de α-carbone des structures cristallines d'OsrHSA et de pHSA a eu comme conséquence un rmsd de 0,67 Å pour le code d'identification de PBD 2I2Z et de 0,69 Å pour 1BJ5.

Aucune différence évidente dans des conformations de principal-chaîne n'a été identifiée entre le pHSA et l'OsrHSA, qui démontre qu'OsrHSA en cellules d'endosperme de riz est plié dans la structure identique comme pHSA dans le plasma sanguin. Comme prévu, 17 liaisons disulfide ont été identifiées en tant que liaisons disulfide véritables, et un résidu libre de cystéine (Cys) a été observé à la position 34. A est connu pour agir en tant que protéine de transporteur, principalement par deux sites de accouplement pour des drogues et 7-9 sites pour les acides gras (27). On a observé huit acides myristiques que lié au de recombinaison A la molécule, et tous les accepteurs d'acide gras dans OsrHSA ont été identifiés aux mêmes emplacements que dans le pHSA. Deux sites drugbinding trouvés dans le pHSA étaient également présents dans OsrHSA. Le site I est une cavité hydrophobe située dans le subdomain II, tracé par les résidus F211, W214, A215, et L238. Deux groupes de résidus polaires responsables de l'interaction de ligand ont été peuplés par les acides aminés Y150, H242, R257, et K195, K199, R218, R222, respectivement. Le site II était une autre poche hydrophobe dans le subdomain IIIA composé de L387, de Y411, de L453, de V433, et de L430. Une région polaire, composée de R410, K414, et S489, a été trouvée dans cet accepteur. La topologie structurelle de ces accepteurs en OsrHSA suggère qu'elle puisse remplir les mêmes fonctions biologiques que le pHSA.